在分子生物学研究中，RNA提取是一个至关重要的步骤。高质量的RNA是成功进行后续实验如RT-PCR、基因表达分析和RNA测序的基础。本文将介绍一种常见的RNA提取方法——Trizol法。
首先，准备所需材料包括Trizol试剂、氯仿、异丙醇、75%乙醇以及RNase-free水。实验开始时，取适量组织样本或细胞悬液加入到离心管中，并加入足量的Trizol试剂以充分裂解细胞，释放出RNA。接下来，将混合物在室温下静置几分钟后，以12,000g离心15分钟，此时会形成三层结构：上层为水相（含RNA）、中间层为蛋白质与脂质、底层为DNA和细胞碎片。
然后，小心吸取上清液至另一新的离心管中，加入等体积的氯仿并剧烈震荡后再次离心。这次离心后的水相仍然含有RNA，而杂质则集中在有机相中。随后，将水相转移到一个新的离心管中，加入异丙醇，混匀后置于-20℃沉淀至少30分钟。
最后，离心收集RNA沉淀，用75%乙醇洗涤两次去除残留的盐分和其他杂质。干燥后的RNA可以用RNase-free水溶解，并储存于-80℃待用。
通过上述步骤可以获得相对纯净的RNA样品，用于各种下游实验。需要注意的是，在整个操作过程中必须保持无RNA酶污染的状态，以确保RNA的质量不受影响。此外，不同类型的样本可能需要调整具体的实验参数，因此建议根据实际情况灵活调整方案。